禽流感(AI)是由A型流感病毒(avian influenza virus,AIV)引起的家禽和野生禽类感染的高度接触性传染病,可呈无症状感染、不同程度的呼吸道症状、产蛋率下降,以至引起头冠和肉髯紫黑色、呼吸困难、下痢、腺胃乳头和肌胃角膜下等器官组织广泛性出血、胰脏坏死、纤维素性腹膜炎和100%死亡率的急性败血症。由于野禽作为流感病毒天然贮毒库的作用,以及已证实流感病毒可以由家禽直接感染人,引起人类的发病和死亡,所以该病具有重要的公共卫生意义。
历史与分布 1878年Perroncito报道了在意大利鸡群发生的一次损失严重的疾病,当时称为“鸡瘟”,一般认为这是对禽流感的最早报道。1901年Centannic等确定禽流感的病原为滤过性病毒,1955年,病毒经鉴定为A型流感病毒。1981年,鉴于过去一般所称的“鸡瘟”一词常常造成鸡新城疫和禽流感之间的混淆,废除了“鸡瘟”这一名称,分别称为新城疫(亚洲鸡瘟)和禽流感(欧洲鸡瘟),并将禽流感分为高致病力禽流感和非高致病力禽流感。
自从首次报道禽流感至今,世界大部分国家和地区均相继有发生禽流感的记录或报道。在过去的30年中,高致病力禽流感大多由H5或H7亚型病毒引起,已发生高致病力禽流感的国家和地区有澳大利亚(1975、1985、1995)、英国(1979)、意大利(1980)、爱尔兰(1983)、美国(1983、1985)、巴基斯坦(1994)、墨西哥(1995)、香港(1997、2001、2002)。
1997年,香港发生H5N1禽流感病毒感染人,引起人发病和死亡,禽流感由于在人类公共卫生上的意义而备受各国政府与有关部门的高度重视和关注。
我国由陈伯伦等于1994年报道从有临床症状的病鸡中分离到非高致病力的H9N3禽流感病毒,唐秀英等1998年报道曾从有临床症状的病鹅中分离到高致病力的H5N1禽流感病毒。
禽流感的病原为禽流感病毒,属于正粘病毒科流感病毒属的A型流感病毒。病毒粒子直径80nm~120nm,平均为100nm。呈球形、杆状或长丝状。病毒表面有一层由双层脂质构成的囊膜,囊膜镶嵌着二种重要的纤突,并突出于囊膜表面。这二种纤突分别为血凝素(Hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)。HA形如棒状,是一种糖蛋白多聚体。NA呈蘑菇状,也是一种糖蛋白多聚体。病毒的基因组属于单股负链RNA。
禽流感病毒在4°~20℃可凝集人、猴、豚鼠、犬、貂、大鼠、蛙、鸡和禽类的红细胞,这是病毒的HA蛋白与红细胞表面的糖蛋白受体相结合的结果,但这种凝集可由病毒的NA蛋白对红细胞受体的破坏而解除。
由于不同禽流感病毒的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)有不同的抗原性,目前已发现有15种特异的HA和9种特异的NA,分别命名为H1~H15,N1~N9,由不同的HA和不同的NA之间可形成200多种亚型的禽流感病毒。
禽流感病毒的命名规则为:病毒型/宿主来源/地域来源/毒株编号/被分离的年份/病毒的亚型等。例如A/鸡/广东/1/92(H9N3),分别表示:A型流感病毒,从鸡体上分离到,来源于广东省,第1个毒株,被分离于1992年,病毒的亚型为H9N3。
禽流感病毒有两类重要的抗原,它们分别为表面抗原和型特异性抗原。表面抗原主要指血凝素和神经氨酸酶,它们是病毒亚型的基本要素。型特异性抗原主要由核蛋白和基质蛋白构成,它为所有亚型的禽流感病毒共有。
禽流感病毒的基因组由8个节段组成,在病毒的增殖过程中很容易发生基因的重排,因此其抗原性发生变异的机率比一般RNA病毒大。变异率最高的是血凝素,其次是神经氨酸酶。这两种抗原的变异可独立发生,也可同时进行。依变异的程度不同,可将它们的变异分为抗原的漂变或漂移。抗原的漂变(Antigenic drift)是指编码NA和HA蛋白的基因发生点突变而导致HA或NA抗原性的微小变化。抗原的漂移(Antigenic shift)主要指编码HA或NA的病毒基因发生基因重组或交换而导致HA或NA抗原的完全改变,它致使病毒发生型的变异。
不同毒株的禽流感病毒在致病力方面有明显的差异。一些毒株是无致病力的,这些毒株长期存在于某些野生的水禽体内,被感染的宿主可没有任何临床的表现,抗体滴度也很低或几乎为零。一些毒株感染敏感家禽后,可在家禽体内诱导产生较高水平的抗体,但被感染禽毫无临床症状和病变。另一些毒株则会引起敏感家禽出现轻度的呼吸道症状和/或产蛋量下降。还有些毒株,即所谓的高致病力禽流感毒株(Highly Pathogenic Avian Iufluenza Virus,HPAIV),可引起敏感禽群产生100%的死亡率。
在临床上,禽流感病毒的致病力常与以下的一些因素有关。(一)家禽的种类 例如一些毒株对鸡有致病力,但对鹅和鸭却无致病力,一些毒株能感染同居的水禽,但却不能感染同居的鸡。(二)家禽的品种和品系 同一禽流感病毒如分别感染外来快大型肉鸡和本地土种黄鸡,则外来快大型肉鸡无论在症状、病变和死亡率上都比土种黄鸡严重。(三)龄期因素 虽然各日龄的鸡对禽流感病毒都敏感,但开产种鸡在产蛋高峰及高峰之后期间特别敏感,老龄家禽的敏感性则低于幼龄禽。(四)家禽的健康状况 同一株禽流感病毒对健康禽群造成的损失低于在健康状况不佳的鸡群造成的损失,在非高致病力毒株感染时这种差异更加明显。(五)应激因素 受冷、贼风、气温的急剧变化等应激因素均明显加重了禽流感感染禽群后出现的临床症状、病理变化和经济损失。(六)细菌的合并或继发感染 无论是在实验室内试验还是生产现场,都可以证明在禽流感感染禽群后,如用适当的抗菌药物控制大肠杆菌、支原体等细菌性感染,所造成的损失相对会低一些。
研究表明,禽流感的毒力与病毒的分子结构有密切的关系:禽流感病毒的致病力是各基因产物共同作用的结果,但HA在其中起着最为重要的作用。病毒感染细胞时,病毒的HA首先与宿主细胞表面的含有唾液酸的细胞受体结合,病毒进入细胞后,HA参与病毒囊膜与细胞膜的融合。要完成这一过程,HA必须经过蛋白酶的切割变成HA1和HA2。自然感染的流感病毒,其对禽类的致病力主要由HA切割位点的氨基酸序列决定。如果HA易于切割,则毒株具有较高的致病性,反之,则致病力较低。研究表明,如切割位点插入多个特殊的碱性氨基酸,那么HA的切割就变得相对容易,病毒的毒力相应增强。
研究还发现,如HA切割位点插入宿主细胞的多肽序列,蛋白酶对切割位点的敏感性也将大大提高,病毒的毒力也将相应增强。这种现象在流感病毒的适应和进化过程中可能普遍存在,并且可能是高致病力流感病毒出现的一个原因。
HA切割位点附近的空间构型发生变化,也影响病毒的致病性。如1983年春发生于美国宾州的禽流感,由于HA的茎部缺失了一个与切割位点非常靠近的寡糖,从而减少了该寡糖对蛋白酶的排阻作用,导致病毒毒力的增强。
禽流感病毒与其它病毒或细菌同时或先后感染动物,也能导致病毒的毒力增强。原因是病毒或细菌的呼吸道感染可使局部的炎症反应蛋白质浓度增加,其中的激肽释放酶、凝血酶、尿激酶、纤维蛋白溶酶对流感病毒有激活作用。因此,混合感染细菌后,流感病毒对宿主的损伤加重。
禽流感病毒对各种理化因素没有超常的抵抗力。对氯仿、乙醚、丙酮等有机溶剂比较敏感;对热敏感,56℃加热30min,60℃加热10min,70℃以上数分钟均被灭活;苯酚、消毒灵(复合酚)、氢氧化钠、雅好生(碘制剂)、漂白粉、高锰酸钾、二氯异氰尿酸钠、新洁尔灭、过氧乙酸等消毒剂均能迅速使病毒灭活。但禽流感病毒对冷湿有抵抗力,在-20℃或-196℃低温下贮存42个月,病毒仍有感染性。
禽流感病毒在自然条件下,能感染多种禽类,在野禽尤其是野生水禽(如野鸭、野鹅、海鸥、燕鸥、天鹅、黑尼鸥等)中,较易分离到禽流感病毒。病毒在这些野禽中大多形成无症状的隐性感染,而成为禽流感病毒的天然贮毒库。
家禽中以火鸡最为敏感,鸡、雉鸡、鸽、鹌鹑、鹧鸪、鸵鸟等均可受禽流感病毒的感染而大批死亡。过去一般认为家鹅和家鸭对禽流感病毒不敏感,感染病毒后大多无明显症状,但近年的资料表明,鹅和鸭在感染H5N1禽流感病毒后,也有明显的症状和病变,尤其对幼龄的鹅、鸭,可引起较高的死亡率。
目前为止,曾经分离到禽流感病毒的禽类有:燕子、麻雀、乌鸦、鸥椋鸟、蓝翅水鸭、斑鸭、漈凫、针尾鸭、鹤、寒鸦、岩鹧鸪、苍鹭、矶鷸、木坚鸟、鹡鴒、八哥、鹦鹉、海滨鸟等。此外,也曾从海豹、鲸、水貂等动物体内分离到禽流感病毒。
过去一般认为,人只能在实验条件下才能被禽流感病毒人工感染,但现在发现,禽流感病毒能直接感染人,并可引起发病甚至死亡。在实验室人工试验中,猪、水貂、猴、猫等均可被禽流感病毒感染。
传染来源主要来自野生禽类(尤其是野生水禽)、受感染的家禽以及观赏鸟等。
禽流感是高度接触性的传染病,可通过多种途径传播感染,被感染禽群的粪便及分泌物污染的饲料、饮水、空气中的尘埃以及笼具、蛋品、种苗、衣物、运输工具,均可通过各种渠道进入其他的健康禽群。带病毒的候鸟和野生水禽在迁栖过程中,沿途可散播病毒。观赏鸟、参赛的鸽子以及其它参加展览的鸟类都可直接或间接将病毒散播到敏感禽群内。与带毒的人或猪的接触也可能引起病毒的传播。
该病一年四季均可流行,但以冬季和气温骤冷骤热的季节更易暴发。
潜伏期从几小时到3d~5d。
禽流感的临床症状可从无症状的隐性感染到100%的死亡率。
一些无致病力的毒株感染野禽、水禽及家禽后,被感染禽无任何临床症状和病理变化,只有在检测抗体时才发现已受感染,但它们可能不断地排毒。产蛋鸡在感染H9N2等低致病力病毒后,最常见的症状是产蛋率下降,但下降程度不一,有时可以从90%的产蛋率在几天之内下降到10%以下,要经过1个多月才逐渐恢复到接近正常的水平,但却无法达到正常的水平;有些仅下降10%~30%,1周至半个月左右即回升到基本正常的水平。产蛋率受影响较严重的鸡群,蛋壳可能褪色、变薄。在产蛋受影响时,鸡群的采食、精神状况及死亡率可能与平时一样正常,但也可能见少数病鸡眼角分泌物增多、有小气泡,或在夜间安静时可听到一些轻度的呼吸啰音,个别病鸡有脸面肿胀,但鸡群死亡数仍在正常范围。在再严重一些的病例,则可见到少数病鸡呼吸困难,张口呼吸,呼吸啰音,精神不振,下痢,鸡群采食量下降,死亡数增多,但如饲养管理条件良好并适当使用抗菌药物控制细菌感染,则不会造成重大的死亡损失。
肉鸡、未开产的种鸡和蛋鸡感染低致病力禽流感病毒后,除没有产蛋下降的变化外,其余的症状与上述产蛋鸡相似。鸽、雉、珍珠鸡、鸵鸟、鹌鹑、鹧鸪等感染低致病力禽流感后,临床症状与鸡相似。
由高致病力毒株,如H5N1禽流感病毒感染鸡后形成的高致病力禽流感,其临床症状多为急性经过。
最急性的病例可在感染后10多个小时内死亡。急性型可见鸡舍内鸡群比往常沉静,鸡群采食量明显下降,甚至几乎废食,饮水也明显减少,全群鸡均精神沉郁,呆立不动,从第2d~3d起,死亡明显增多,临床症状也逐渐明显。病鸡头部肿胀,冠和肉髯发黑,眼分泌物增多,眼结膜潮红、水肿,羽毛蓬松无光泽,体温升高;下痢,粪便黄绿色并带多量的黏液或血液;呼吸困难,呼吸啰音,张口呼吸,歪头;产蛋率急剧下降或几乎完全停止,蛋壳变薄、褪色、无壳蛋、畸形蛋增多,受精率和受精蛋的孵化率明显下降;鸡脚鳞片下呈紫红色或紫黑色。在发病后的5d~7d内死亡率几乎达到100%。少数病程较长或耐过未死的病鸡出现神经症状,包括转圈、前冲、后退、颈部扭歪或后仰望天等。
鹅和鸭感染高致病力禽流感病毒后,主要表现为肿头,眼分泌物增多,分泌物呈血水样,下痢,产蛋率下降,孵化率下降,神经症状,头颈扭曲,啄食不准,后期眼角膜混浊。死亡率不等,成年鹅、鸭一般死亡不多,幼龄鹅、鸭死亡率比较高。
鸽、雉、珍珠鸡、鹌鹑、鹧鸪等家禽感染高致病力禽流感病毒后的临床症状与鸡相似。
低致病力禽流感常见的肉眼病理变化为喉气管充血、出血,在气管叉处有黄色干酪样物阻塞,气囊膜混浊,典型的纤维素性腹膜炎,输卵管黏膜充血、水肿,卵泡充血、出血、变形,肠黏膜充血或轻度出血,胰腺有斑状灰黄色坏死点。
高致病力禽流感的肉眼病变包括心肌坏死,坏死的白色心肌纤维与正常的粉红色心肌纤维红白相间,胰腺有黄白色坏死斑点,腺胃乳头、腺胃与肌胃交界处、腺胃与食道交界处、肌胃角质膜下、十二指肠黏膜出血,喉气管黏膜充血、出血,以上病变均为敏感鸡感染高致病力禽流感病毒后比较恒定的病变。有些病例还可见头颈部、腿部皮下胶样浸润,肝有黄白色坏死点,其余器官组织则多呈出血性病变。
显微镜下,其病理组织学病变不尽相同,较常见的为心肌炎,心肌纤维坏死,胰腺炎,腺泡细胞坏死,肝、脾、肾、心肌充血、水肿、出血,脑血管周围形成淋巴细胞血管套,脑组织坏死,神经胶质细胞增生等。 对高致病力禽流感,根据病鸡已有较高的鸡新城疫抗体而又出现典型的腺胃乳头、肌胃角质膜下出血的病变,以及心肌、胰腺坏死等,鹅和鸭的头肿、眼的血样渗出物和典型的神经症状等可作出初步诊断。在已做过禽流感免疫接种的禽群,由于症状和病变不典型,仅凭症状和病变则较难作出初步诊断。
确诊必须做病毒的分离与鉴定,可选取病死禽的气管和支气管、心、肝、脾、胰、脑,以及直肠、泄殖腔和喉气管棉拭子等作为分离病毒的病料用。
将病料按1:5比例加入生理盐水,制成匀浆,离心取上清液,加入庆大霉素、制霉菌素等抗菌药物灭菌或用过滤器除菌,经尿囊腔接种SPF鸡胚或非免疫鸡胚,每胚0.2ml。置37℃温箱中培养,24h前死亡的鸡胚废弃,24h后死亡的鸡胚经冷冻后取尿囊液待检,对第5d尚未死亡的鸡胚,也作冷冻处理后收取尿囊液。收取的尿囊液,一部分作HA检测,另一部分作下一代鸡胚盲传,如连续盲传2~3代HA仍呈阴性即可放弃。
对已收获的鸡胚尿囊液,可检测对鸡红细胞的凝集效价(HA),如HA呈阳性反应,则分别用禽流感抗血清、新城疫抗血清、减蛋综合征抗血清对被分离的病毒作HI检验,如被分离病毒的HA活性不能被新城疫抗血清、减蛋综合征抗血清所抑制,但能被禽流感阳性血清抑制,则证实分离的病毒为禽流感病毒。
还可以用琼脂扩散试验等对分离病毒作进一步鉴定。由于A型流感病毒有共同的核衣壳和基质抗原,可用被感染鸡胚的尿囊液或尿囊膜研磨匀浆,反复冻融后取上清液作抗原,与已知A型流感抗血清作琼脂扩散试验,如为阳性,则进一步证实被分离病毒为A型流感病毒。然后,可分别用已知的抗H1~H15亚型血凝素的抗血清以及抗N1~N9亚型神经氨酸酶抗血清与已知病毒做微量抑制试验,以确定被分离病毒的HA与NA的亚型。
对流感病毒致病性的鉴定,目前国际上已认可的方法有:
(一)将感染病毒的鸡胚尿囊液作10—1稀释后,经静脉接种8只4~8周龄的敏感鸡,每只0.2ml。在接种后10d内,死亡数量在6只或6只以上时,该病毒为高致病力禽流感病毒。
(二)被分离的病毒致死1~5只鸡,但不是H5或H7亚型的病毒,则将病毒接种于细胞上,如病毒在缺乏胰蛋白酶时不能在细胞上生长,不能形成细胞病变,则该病毒为非高致病力禽流感病毒。
(三)被分离的病毒能致死1~5只鸡,而且是H5或H7亚型,则如果病毒能在缺乏胰蛋白酶的细胞上生长,或其血凝素多肽经氨基酸序列分析,与高致病力禽流感病毒的序列相似,则被分离的病毒也被认为是高致病力禽流感病毒。
除此之外,有些国家以静脉接种指数(IVPI)大于1.2,或仅凭H5或H7亚型病毒血凝素多肽氨基酸序列与高致病力禽流感病毒相似为标准,而将被分离病毒判为高致病力禽流感病毒。
在血清学检测方法上,琼脂扩散试验可检测A型流感病毒的共同抗原,如被检血清与已知AI沉淀抗原呈阳性反应,即可判定禽群受禽流感感染,但它不能分辨是新近的感染还是过往的感染,也不能分辨抗体是野毒感染还是接种禽流感疫苗引起的。但在没有接种过禽流感疫苗的地区,琼扩试验在流行病学的调查方面仍具有简便、特异性强的优点,若在广泛接种过疫苗的地区,则意义不大。血凝和血凝抑制试验在对新分离病毒的鉴定,尤其是HA亚型鉴定方面有重要意义,但由于流感病毒的HA亚型多,所以一般不用于对疾病的诊断上,而在已接种禽流感疫苗的地区,HI试验则可用于对免疫效果的监测上。
其他检验方法,例如荧光抗体技术、中和试验(NT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、补体结合反应、免疫放射试验和RT-PCR等均可用于禽流感的诊断。
高致病力禽流感由于危害严重,而且已有H5N1亚型禽流感病毒感染人发病致死的报道,所以必须高度重视和严肃处理。
一旦发现可疑病例,应立即向当地兽医部门报告,同时对病鸡群(场)进行封锁和隔离;一旦确诊,立即在有关兽医部门指导下,划定疫点、疫区和受威胁区。疫点是指患病禽所在的禽场、专业户或独立的经营单位,在农村则为自然村;疫区指以疫点为中心,半径3~5公里范围内的区域,受威胁区指沿疫区顺延5~30公里范围内的区域。由县及县级以上兽医行政主管部门报请同级地方政府,并由地方政府发布封锁令,对疫点、疫区、受威胁区实施严格的防范措施。严禁疫点内的禽类以及相关产品、人员、车辆以及其它物品运出,因特殊原因需要进出的必须经过严格的消毒;同时扑杀疫点内的一切禽类,扑杀的禽类以及相关产品,包括种苗、种蛋、菜蛋、动物粪便、饲料、垫料等,必须经深埋或焚烧等方法进行无害化处理;对疫点内的禽舍、养禽工具、运输工具、场地及周围环境实施严格的消毒和无害化处理。禁止疫区内的家禽及其产品的贸易和流动,设立临时消毒关卡对进出运输工具等进行严格消毒,对疫区内易感禽群进行监控,同时加强对受威胁区内禽类的监察。
在对疫点内的禽类及相关产品进行无害化处理后,还要对疫点反复进行彻底消毒,彻底消毒后21d,如受威胁区内的禽类未发现有新的病例出现,即可解除封锁令。
对非高致病力禽流感,从现有资料看,如加强饲养管理,适时使用抗病毒药物,仍有一些早期预防、减轻症状和减少损失的作用。在意大利,曾用盐酸金刚烷胺治疗一大群日本鹌鹑,使死亡率下降了50%。金刚烷胺目前仍是人类流感的有效防治药物,除金刚烷胺外,盐酸金刚乙胺、病毒唑及一些中草药也有减轻禽流感损失的作用。在使用金刚烷胺防治禽流感期间,家禽体内的血清、肌肉、肝脏及蛋中均有金刚烷胺存在,但停药后24h,体内的药物残留已降到接近零。不过,金刚烷胺虽能减轻禽流感的损失,但并不能阻止家禽的排毒。病毒在药物作用下,很快就产生变异,出现了抗金刚烷胺的新毒株。使用金刚烷胺防治禽流感时,用药要早,在鸡群刚有症状苗头时即用药,效果较好,如到症状明显时再使用,则效果很差,盐酸金刚烷胺的使用剂量为0.005%~0.01%饮水,连续5d~7d。
实验结果还显示,对非高致病力禽流感,适当使用抗菌药物控制细菌性感染,也可以减少死亡损失。如感染早期在饮水中加入氟甲砜霉素、利高霉素、强力霉素、恩诺沙星、环丙沙星,或经肌肉注射青霉素和链霉素、庆大霉素等,均可减轻一些死亡损失。如能及时与抗病毒药物联合使用,效果更好些。
对非高致病力禽流感,在发病期间,如进行新城疫、传染性支气管炎、传染性喉气管炎等弱毒疫苗的接种,往往会加重禽群的死亡损失,尤其是如将疫情误诊为鸡新城疫并用新城疫I系疫苗紧急预防接种时,死亡明显增加。
预防方面应注意做好常规的卫生防疫工作,将病毒拒之门外,这是预防措施中最基本的和最重要的,尤其是定期的消毒,因为尽管已采取了严格的预防措施,有时病毒还是可能通过流动的空气、飞鸟的粪便等进入禽场内。但病毒的进入不等于疾病的暴发,任何一种微生物均需要有一定的量才能使敏感动物发病,经常的消毒就可以将环境内可能存在的病毒消灭或降低到最低数量,避免或减少疾病的发生。
做好禽群对新城疫、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、马立克氏病等的免疫接种,尤其是使禽群保持较高水平的新城疫HI抗体滴度,定期用弱毒疫苗经滴眼、滴鼻或喷雾免疫以加强呼吸道局部的特异性或非特异性免疫力,对减轻禽流感的风险和损失有一定的作用。在一个鸡场内,凡是新城疫抗体滴度较高或刚刚经过新城疫弱毒疫苗滴眼、滴鼻或气雾免疫的鸡群,发生非高致病力禽流感的机率相对会低一些,一旦发生后出现的临床症状、病理变化、蛋产量下降及死亡率方面均低于新城疫抗体水平低的鸡群。在实验室内,将1日龄鸡苗分成两群,隔离饲养,其中一群不做任何免疫,另一群在1日龄及10日龄时分别用常量的克隆30新城疫弱毒疫苗滴眼、滴鼻免疫,28日龄时分别对两群鸡用禽流感病毒攻击。结果不做免疫的鸡群死亡率达98%,而经过两次新城疫免疫的鸡群死亡率70%,试验重复了2次,结果基本相同。这也许是新城疫的弱毒疫苗免疫使鸡群产生了干扰素和/或增强了非特异性免疫,提高了对禽流感强毒攻击的抵抗力。
免疫接种可以避免养禽业的严重损失,尤其是在高致病力禽流感疫情已扩散,试图通过严格的封锁、隔离和扑杀清除疾病,无论在财政上还是技术措施上均有困难时,对家禽实施有计划的免疫接种还是可取的,但免疫接种也有它的弊端。由于免疫接种虽然可以避免严重的死亡损失,但却不能防止家禽的带毒和排毒,在实施免疫接种后,必将长期存在带毒和排毒的禽群;禽流感病毒在免疫抗体的压力下也会加速变异,有可能使疫情更为复杂。另外,由于一般血清学方法尚未能区别免疫抗体和野外病毒引起的抗体,也使今后的流行病学的调查更为麻烦。
目前,禽流感疫苗的种类主要有基因工程疫苗、弱毒疫苗和灭活疫苗。
由于禽流感病毒的高度变异性,所以一般都限制弱毒疫苗的使用,以免弱毒在使用中变异而使毒力返强,形成新的高致病力毒株。
灭活疫苗有组织灭活疫苗、灭活的蜂蜡佐剂疫苗、灭活氢氧化铝疫苗、灭活油乳剂疫苗等,其中以灭活油乳剂疫苗应用较多。
虽然,实验室内的数据显示,禽流感与新城疫二联疫苗、禽流感与新城疫和传染性支气管炎三联疫苗对其中任何一种抗原的免疫效果均无明显的不良影响,但在疫苗的规模化生产中,由于疫苗中的油与水是有一定比例的,如果抗原不作浓缩处理,则单一疫苗中所含的抗原量往往会比多联疫苗所含的抗原量多。所以在疾病威胁较严重的季节,选用单一的禽流感疫苗比用多联疫苗更为稳当些,尽管操作起来比较麻烦。
对于不同亚型的禽流感病毒,如果用HI试验来检测交叉反应,则不同的H亚型病毒之间没有或仅有较低的交叉反应。在生产中应根据当地病毒的亚型选择疫苗,对本地存在的血清亚型不清楚或比较复杂的情况下,可适当选用2~3种主要亚型制成的多价疫苗。
关于疫苗的接种时间和次数,没有一个固定的模式。从实验室试验数据看,对2月龄以上的鸡接种一次油乳剂疫苗后6个月,对同一亚型强毒攻击仍有100%保护。但在生产中使用时,由于个体差异、操作失误、饲养管理条件、其他疾病及药物的影响等,实际保护时间要比室内试验短些,所以还是以每3个月接种一次为妥;对于饲养期较长的家禽,可在5~15日龄时接种一次,50~60日龄时接种一次,开产前接种一次,以后每3个月再接种一次。
灭活油乳剂疫苗的接种途径为肌肉或皮下注射,推荐的免疫接种量为:15日龄的肉鸡,每只一次0.3ml,日龄较大的鸡每只0.5ml;中鹅每只1ml,成年鹅每只2ml~3ml;小鸭每只0.3ml,中鸭每只0.5ml,成鸭每只注射1ml~2ml。
质量良好的禽流感油乳剂灭活疫苗接种家禽后一般无明显的不良反应,有时可能会引起产蛋率稍微下降,几天后即可恢复正常;有时在注射疫苗后几个小时内,禽群稍沉静,然后很快恢复正常,这可能是疫苗中含抗原灭活剂偏多,对注射部位强烈刺激作用所致。有时注射疫苗后注射部位发热、肿胀、甚至溃烂,如果是个别问题,可能是注射时针头碰到羽毛、污物所致;如为普遍现象,则可能与疫苗有关,例如,可能是矿物油质量欠佳或疫苗受污染等。
禽群接种禽流感疫苗后,对免疫效果的监测可参考鸡新城疫抗体监测的HI试验,只是所用的抗原改为灭活的禽流感病毒,并且要与制备疫苗用的病毒抗原是同一H亚型。
由于病毒的感染途径、家禽的敏感性和龄期不同,对禽流感病毒的抵抗力也有明显差异,所以很难划定一个可以保证家禽不受感染的HI抗体滴度阈值,幼龄家禽免疫后的HI抗体水平一般不高,30日龄以下的家禽接种疫苗后如受高致病力禽流感病毒的感染,则还是会有较大的死亡损失,2月龄以上的家禽,如果HI抗体效价在6 log2以上,一般不会出现大批死亡,HI抗体效价在8 log2以上,一般不会出现死亡,10 log2以上,则产蛋率一般不会出现严重的下降。
疫苗接种虽然可以避免家禽的毁灭性死亡损失,但不能指望接种灭活疫苗后,就可以完全防止禽流感的发生。由于灭活疫苗虽能诱导机体产生较高的循环抗体,但免疫禽的呼吸道、消化道和生殖道的局部免疫力仍较弱,所以在接种疫苗后仍然可能会出现一些不同程度的呼吸道症状、产蛋量下降等,因此,在接种疫苗同时,必须继续加强禽场的总体卫生防疫工作,才能切实避免禽流感的发生。