摘 要
作两次试验，以确定在产蛋鸡之黄霉毒素症之间，色氨酸辅助，对脂肪蓄积及产蛋率之相关。在试验1，对一完全产蛋鸡饲料、辅助两种色氨酸水准(0及2,000 ppm)；基本饲料＝0.16％色氨酸)，及两种黄霉毒素水准(0及10 ppm)。在试验2，添加第3种黄霉毒素水准(5 ppm)於设计。在试验1及试验2，此饲料各别给与单冠白来亨鸡(58及68周龄)3周。每日测定鸡日产蛋率及蛋重，每周测定饲料摄取，在每一试验结果，测定肝重、肝水分及肝总脂肪。
在试验1，独自辅助色氨酸，与对照(没有色氨酸或黄霉毒素)相较，引起显着的总脂肪降低(P＜0.01)。与单独添加黄霉素相较，添加色氨酸及黄霉毒素，会引增加总肝脂肪及引起产蛋率降低(P＜0.05)。对0色氨酸：0黄霉毒素、2,000 ppm色氨酸：0黄霉毒素、0色氨酸：10黄霉毒素及2,000 ppm色氨酸：10黄霉毒素之总肝脂肪，各别为41.1、32.8、54.8及62.4％(乾基)。在试验2，发现同样之结果，结论是单独辅助色氨酸，会引起总肝脂肪降低，但当辅助於含有黄霉毒素之饲料时，色氨酸会引起关连黄霉毒素症之产蛋鸡伤害增加严重性。
一、前 言
黄霉毒素症为起因於摄取污染黄霉毒素饲料之一种严重中毒，黄霉毒素为霉菌Aspergillus flarus之主要毒性代谢物。此疾病会导致家禽产业经济性损失，主要来自降低生产，虽亦能发生高死亡率(1989 Muirhead)。黄霉毒素症导致肉鸡由於血液凝固病及毛细管胆弱(1975 Turg；1976 Derr；1982 Bababunmi及Bassir)，低蛋白血症(1965 Brown及Abrams)及增加脂肪含量之增大的出血性肝的增加瘀伤(1970 Mu-ller；1970 Sims；1970 Smith及Hamilton；1970 Zytveld；1971、1972 Hamilton及Garlich；1988 Fukal)。据Tnug (1972)之报告，伤害脂肪输送，可能归因於抑制RNA合成，引起肝脂肪之显着增加(主要为甘油三脂)并减少血浆脂肪。
据最近数种研究报告，为要最大生产，色氨酸以需求量以上加入饲料，可能引起肉鸡及蛋鸡之总肝脂肪降低(1988 Akiba；1989ab Rogers及Pesti)，Rogers及Pesti (1989b)表示，以1,000及2,000 ppm色氨酸辅助玉米－黄豆粉基本饲料(基本饲料之色氨酸含量＝1,660 ppm)之反应，大增加血浆胆固醇、甘油三脂及非酯化脂肪。Ohtani (1989)假设，产蛋鸡之肝脂肪，对色氨酸之所见反应，可能归因於雌激素活性之可能改变。
利用鼠类之试验指出，口服处理之色氨酸，对数种肝毒性剂有抑制效果(1972 Sidransky；1973 Sarma；1982 Sidransky；1985 Sidransky)。Sidransky (1982)发现，在黄霉毒素症期间，对色氨酸之反应，会增加肝蛋白质合成，而判明色氨酸有阻止黄霉毒素之伤害效果。本研究之目的，为确定辅助色氨酸，对有严重黄霉毒素症蛋鸡的总肝脂肪之相关。
二、原料及方法
以可升铁丝网鸡笼，每笼收容1只单冠白来亨蛋鸡，作两次试验。试验1及2，开始试验时，各别为58及68周龄，任供饲料及饮水，照明时间为16小时(4点至20点)。配合基本饲料，使适合或超过产蛋鸡之NRC需求量(1984)(表1)。依照如West (1973)修正之Shotwell之方法，生产黄霉毒素(1966)。以与对照(0辅助色氨酸及0水准黄霉毒素)相较之个别预先计划之对比，分开平均数。
表一 蛋 鸡 饲 料 之 组 成<--mstheme-->
|
成 分 及 组 成<--mstheme--> |
％ <--mstheme--> |
|
碎玉米
黄豆粉(48.5％CP)
石灰石粉
玉米筋料(62％CP)
家禽副产物粉
去氟磷酸盐
家禽脂肪
食 盐
维生素预混物1
Dl－甲硫氨酸
微量矿物质预混物
l－离氨酸
计 算
粗蛋白质，％
ME，kcal／g
钙
有效P，％
甲硫氨酸＋胱氨酸，％
离氨酸
测 定
色氨酸，％<--mstheme--> |
70.08
14.47
7.71
2.50
2.50
1.03
1.00
0.09
0.25
0.06
0.05
0.05
16.26
3.00
3.39
0.32
0.63
0.76
0.16<--mstheme--> |
(1)每Kg饲料供给：维生素A 5,500IV；维生素D3 1,100ICV；维生素11IV；riboflavin 4.4mg；泛酸钙12mg；菸硷酸44mg；氯化胆硷220mg；维生素B12 6.6μg；维生素B6 2.2mg；menadione 1.1mg(以menadione重亚硫酸钠)；叶酸0.55mg；d－生物素0.11 mg；thiamin 2.2mg；ethoxyquin 125mg。
(2)供给饲料之ppm；锰60；锌50；铁30；铜5；碘1.5；硒0.3。
在每3周试验之开始及结束，秤鸡重，每日测定饲料消耗。每日记录产蛋率及重量。在试验结束，以颈部脱节法宰杀供试鸡，并立刻去除肝，秤重，并分析总脂肪(1957 Folch)，对个别肝作分析，并集计双重复之结果。
以0及2,000ppm辅助色氨酸，及在试验1为0及10ppm黄霉毒素，在试验2为0、5及10ppm黄霉毒素之因素组合处理，完全逢机试验1及2。每一试验有每一处理3重复，每重复5只，利用统计分析学会(1985)之一般线型复式(GLM)的变异分析，检查模式。
三、结 果
在任一试验，饲料摄取没有显着受色氨酸或黄霉毒素辅助之影响(P＞0.10)(表2及表3)。在色氨酸与黄霉毒素之间，对产蛋率有显着之交互作用(P＜0.05)。当独自辅助色氨酸於饲料时，改善产蛋率；但有黄霉毒素添加色氨酸时，产蛋率却降低。试验2之结果很类似。第3周前，色氨酸×黄霉毒素之交互作用显着(P＜0.05)，蛋重差异不能归因於任一处理之饲料处理。
表二 辅助色氨酸及黄霉毒素对躅鸡之鸡日产蛋率、蛋重及饲料摄取之效果<--mstheme-->
|
黄 霉毒 素(ppm)<--mstheme--> |
试 验<--mstheme--> |
周 <--mstheme--> |
色 氨 酸 辅 助<--mstheme--> |
|
0 ppm<--mstheme--> |
2,000 ppm<--mstheme--> |
|
产 蛋 率<--mstheme--> |
蛋 重<--mstheme--> |
饲料摄取 <--mstheme--> |
产 蛋 率<--mstheme--> |
蛋 重<--mstheme--> |
饲料摄取 <--mstheme--> |
|
0
5
10<--mstheme--> |
1
2
2
1
2<--mstheme--> |
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3<--mstheme--> |
(％)
75.2
71.4
73.3
80.4
72.9
80.9
76.9
77.3
74.7
89.5
76.2
60.0
76.4
66.7
42.7<--mstheme--> |
(g)
60.1
61.2
60.2
60.8
62.1
61.6
61.8
62.0
62.4
63.3
60.6
63.2
61.7
61.8
62.8<--mstheme--> |
(g／日)
96.7
91.0
94.7
85.9
92.4
91.2
90.5
93.0
88.0
103.4
99.5
88.8
85.3
90.0
80.5<--mstheme--> |
(％)
85.7
81.0
83.8
83.1
82.2
77.3
70.2
61.8
45.8
87.6
67.6
38.1
79.1
60.9
16.8<--mstheme--> |
(g)
62.5
61.0
62.0
62.6
63.7
63.5
62.2
63.1
63.4
61.8
63.8
62.5
62.1
62.5
62.6<--mstheme--> |
(g／日)
101.1
96.1
100.4
87.1
97.3
90.8
78.6
85.3
77.0
98.2
91.8
87.1
83.3
91.0
66.9<--mstheme--> |
在所有案例，添加黄霉毒素於饲料，显着影响相对之肝大小(g肝／g体重)及肝重(表4)。辅助黄霉毒素会引起与对照群相较之肝增大。独自辅助色氨酸，没有引起与对照相较之肝大小或肝重之变化。但当与10ppm黄霉毒素组合时，会引起较大於单独黄霉毒素之较大增加。在试验1，色氨酸×黄霉毒素之交互作用显着(P＝0.043)。在试验2，为近乎显着(P＝0.083)。单独添加10ppm黄霉毒素时，在试验1及2增加70％及88％，而以色氨酸＋10ppm黄霉毒素辅助处理，却发生97及138％之增加。
表三 对 因 变 数 之 变 异 分 析 的 显 着 值
<--mstheme-->
|
因 变 数<--mstheme--> |
独 立 变 异2<--mstheme--> |
|
周 <--mstheme--> |
色 氨 酸<--mstheme--> |
黄霉毒素 <--mstheme--> |
×色 氨 酸<--mstheme--> |
|
试验1
产 蛋 率，％
蛋 重，g
饲料摄取，g
肝 重
相对之肝大小g／100g体重
肝 水 分，g
肝 水 分，g／100g肝
肝 脂 肪，g
肝 脂 肪g／100g
肝脂肪g／100g／100乾物质
试验2
产 蛋 率，％
蛋 重，g
饲料摄取，g
肝 重，g
相对之肝大小g／100g体重
肝 水 分，g
肝 水 分，g／100g肝
肝 脂 肪，g
肝 脂 肪g／100g
肝脂肪g／100g乾物质<--mstheme--> |
1
2
3
1～3
1～3
1～3
1
2
3
1～3
1～3
1～3<--mstheme--> |
0.217
0.075
0.156
0.111
0.462
0.391
0.894
0.838
0.587
0.203
0.317
0.122
0.081
0.937
0.610
0.239
0.737
0.297
0.819
0.692
0.668
0.970
0.866
0.646
0.927
0.949<--mstheme--> |
0.105
0.337
0.081
0.746
0.298
0.594
0.001
0.001
0.001
0.045
0.001
0.022
0.010
0.523
0.418
0.001
0.011
0.736
0.350
0.001
0.001
0.001
0.001
0.001
0.001
0.001<--mstheme--> |
0.295
0.025
0.009
0.031
0.694
0.244
0.116
0.043
0.591
0.019
0.003
0.012
0.026
0.999
0.174
0.850
0.132
0.557
0.330
0.056
0.083
0.725
0.088
0.049
0.552
0.823<--mstheme--> |
(1)P＞F，Ho：μ1＝μ2
(2)黄霉毒素
表四 辅助色氨酸及黄霉毒素对肝重(g)及相对肝大小之效果(g／100g体重)(1)<--mstheme-->
|
黄 霉
毒 素
(ppm)<--mstheme--> |
试 验<--mstheme--> |
辅 助 色 氨 酸<--mstheme--> |
|
0 ppm<--mstheme--> |
2,000 ppm<--mstheme--> |
|
肝 重<--mstheme--> |
相对肝大小 <--mstheme--> |
肝 重<--mstheme--> |
相对肝大小 <--mstheme--> |
|
0
5
10<--mstheme--> |
1
2
2
1
2<--mstheme--> |
47.5±3.7
40.5±2.2
60.1±4.7
80.6±1.8
76.3±4.4<--mstheme--> |
2.72±0.10
2.44±0.07
3.48±0.09
4.60±0.07
4.59±0.16<--mstheme--> |
48.2±5.4
42.1±1.9
59.0±5.1
93.5±1.6
96.2±4.8<--mstheme--> |
2.76±0.19
2.41±0.03
3.56±0.35
5.26±0.12
5.33±0.32<--mstheme--> |
(1)平均±SE(n＝3)
总肝水分类似，但逆关连肝大小(表5)，在此两试验，与对照相较，黄霉毒素显着降低肝之水分％。与单独添加黄霉毒素相较，色氨酸组合黄霉毒素，甚致更显着降低水分％(试验1)。
表五 辅助色氨酸及黄霉毒素对肝水分(g及％)之效果(1)<--mstheme-->
|
黄 霉
毒 素
(ppm)<--mstheme--> |
试 验<--mstheme--> |
辅 助 色 氨 酸<--mstheme--> |
|
0 ppm<--mstheme--> |
2,000 ppm<--mstheme--> |
|
水 分<--mstheme--> |
水 分<--mstheme--> |
水 分<--mstheme--> |
水 分<--mstheme--> |
|
0
5
10<--mstheme--> |
1
2
2
1
2<--mstheme--> |
(g)
29.5±1.3
27.6±1.4
36.2±2.2
47.6±2.3
44.3±1.4<--mstheme--> |
(％)
63.4±2.7
68.7±1.4
60.7±1.1
58.4±1.8
58.6±1.5<--mstheme--> |
(g)
28.4±1.2
28.5±1.2
37.1±2.0
48.1±0.9
53.0±3.7<--mstheme--> |
(％)
66.8± 1.1
68.0± 0.9
61.8± 1.9
51.8±0.04
56.8± 1.5<--mstheme--> |
(1)平均±SE(n＝3)
对此两试验，黄霉毒素引起显着的增加总肝脂肪之克数及相对肝重之总脂肪(g脂肪／g肝；湿或乾基)(表6)。在试验1，在色氨酸与黄霉毒素之间，对肝脂肪亦有显着之交互作用(P＜0.05)，且在试验2之肝脂肪克数指出，辅助色氨酸於含有黄霉毒素之饲料，与单独添加黄霉毒素相较，会增加脂肪量。在试验1，与有10ppm黄霉毒素，亦辅助色氨酸时，增加52％相较，黄霉毒素(10ppm)会引起相对肝脂肪(乾基)增加33％。在试验2，亦发现类似靶式。在试验2，在10ppm黄霉毒素水准，发现效果最大，在任一试验，没有检出体重之显着差异。
四、讨 论
本研究之结果指出，辅助色氨酸於含有黄霉毒素饲料没有缓和关连黄霉毒素症之脂肪肝，但如藉此参数所指示的，会增加中毒之严重性。此发现与Sidransky之报告(1982)相反，他们自老鼠生物化学资料，判明色氨酸似乎有抑制肝组织之黄霉毒素的效果。此差异可能是由於动物种类，管理经路或关连色氨酸辅助之蛋白质合成增加之判明，没有指出关连黄霉毒素症之逆效果。
表六 辅助色氨酸及黄霉毒素对肝脂肪克数及肝脂肪％(湿及乾基)之效果(1)
<--mstheme-->
|
黄 霉
毒 素
(ppm)<--mstheme--> |
试 验<--mstheme--> |
辅 助 色 氨 酸<--mstheme--> |
|
0 ppm<--mstheme--> |
2,000 ppm<--mstheme--> |
| 总脂肪<--mstheme--> |
肝脂肪2<--mstheme--> |
肝脂肪3<--mstheme--> |
总脂肪<--mstheme--> |
肝脂肪1<--mstheme--> |
肝脂肪2<--mstheme--> |
|
0
5
10<--mstheme--> |
1
2
2
1
2<--mstheme--> |
( g )
7.5±1.8
3.9±0.6
12.1±1.7
18.5±1.8
17.5±2.2<--mstheme--> |
(％)
15.7±4.1
9.6±1.3
20.1±1.3
23.0±3.0
23.0±1.7<--mstheme--> |
(％)
41.1±5.0
29.8±2.4
50.7±1.9
54.8±2.8
55.0±2.0<--mstheme--> |
( g )
5.4±0.6
3.9±0.5
12.4±2.1
28.2±0.7
24.0±1.5<--mstheme--> |
(％)
11.2±0.8
9.4±1.4
21.1±2.1
30.2±0.4
24.9±0.3<--mstheme--> |
(％)
32.8±1.2
29.2±3.3
51.7±2.4
62.4±0.7
56.1±3.4<--mstheme--> |
(1)平均±SE(n＝3)
(2)湿基
(3)乾基
此地所报告之黄霉毒素对产蛋率之一般效果，与先前之产蛋鸡的报告一致(1970 Sims；1971 Hamilton及Garlich；1972 Tung)。始终伴随饲料摄取降低之产蛋率降低，为典型之黄霉毒素症之证明。独自辅助色氨酸，对产蛋率之效果，类似Rogers及Pesti (1989b)之报告，但不类似Ohtani之报告，他们指出当添加辅助之色氨酸於饲料时，会增加鸡日产蛋率。色氨酸显然会增加黄霉毒素症之严重性，此点不能归因於单纯之氨基酸不平衡，因独自辅助色氨酸，没有降低产蛋率，且在某案例，会略改善效能。蛋重亦没有受添加2,000 ppm色氨酸於饲料之影响。Rogers及Pesti (1989b)先前之报告指出，高到3,000 ppm之色氨酸辅助水准，对产蛋率特性没有负效果，只有4,000 ppm才有略降低产蛋率。
肝脂肪反应类似产蛋率，独自之黄霉毒素会产生肝脂肪增加。比对照，独自之色氨酸辅助，会显着降低总肝脂肪，此点证实先前之产蛋鸡的结果(1989b Rogers及Pesti)，但当添加色氨酸辅助於含有黄霉毒素之饲料时，发现比单独之黄霉毒素更增加。
在家禽，黄霉毒素被肝之混合功能氧化鶤系统代谢，主要代谢产物为黄霉毒素B1及其他较少毒性之水解衍生物，然後这些代谢产物共轭促进此代谢物之固有毒性之降低，并增加排泄速率。本研究曾证实，一种高毒性代谢物之黄霉毒素B1-di-hydrodiol之产物，有结合巨大分子(例如核酸)之能力，此代谢物最可能自黄霉毒B1-2，3-epoxide之水化形成。因此色氨酸可能会抑制这些反应或使黄霉毒素转成其epoxide或水化型，这将扮演一较大之毒性效果。这点似乎与指出含有iudole之化合物，会增加微粒体之混合功能氧化鶤之活性报告(1978 Watten berg)对比。这仍然说明饲料色氨酸是否增加混合功能氨化鶤活性，尤其在鸟种类。
判明色氨酸不能缓和蛋鸡之黄霉毒素症之不利效果，但似乎会升高此疾病之严重性。与单独之黄霉毒素相较，添加色氨酸於有黄霉毒素之饲料，会增加总肝脂肪及肝大小，降低水分％，并降低产蛋率。色氨酸与黄霉毒素连合，导致之伤害严重性增加，其机构不明。当发生敏感性增加时，蛋鸡可能是在这些条件，适合於研究关连黄霉毒素或色氨酸之毒性效果的模式。
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